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　　　全面實(shí)施蠶種成品檢疫技術(shù) 促進(jìn)蠶繭單產(chǎn)效益提高
　　　　　　　　曾華明 吳鋼

　　（四川省蠶業(yè)管理總站 四川省蠶種質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站

　　農(nóng)業(yè)部蠶桑產(chǎn)業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（成都） 成都 610041）


　　內(nèi)容摘要：本文就實(shí)施蠶種成品檢疫技術(shù)的歷史原因、具體方法、應(yīng)用效果進(jìn)行了介紹，對(duì)在實(shí)施過程中存在的問題進(jìn)行了探討和分析，提出了為保證使用蠶種質(zhì)量、促進(jìn)蠶繭單產(chǎn)效益提高，應(yīng)堅(jiān)持成品卵檢疫、完善檢疫技術(shù)的建議。

　　關(guān)鍵詞：蠶種 成品檢疫 單產(chǎn)效益

　　家蠶微粒子病是由蠶微粒子原蟲（Nosema bombycis Naegeli）感染而引起的毀滅性蠶病，是全世界養(yǎng)蠶業(yè)重點(diǎn)檢疫和防治對(duì)象。我國(guó)將蠶微粒子病列入進(jìn)境動(dòng)物二類傳染病、寄生蟲病名錄。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《桑蠶原種》GB19179-2003、《桑蠶原種檢驗(yàn)規(guī)程》GB19178-2003和農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《桑蠶一代雜交種》NY326-1997、《桑蠶一代雜交種檢驗(yàn)規(guī)程》NY/T327-1997，均將微粒子病檢疫列為重要檢測(cè)項(xiàng)目。

　　成品卵微粒子病檢疫是對(duì)蠶種實(shí)施直接檢疫，避免了母蛾微粒子病檢疫因間接檢測(cè)的母蛾樣本的真實(shí)性、代表性等問題造成的誤判、漏判，保證蠶種的微粒子病卵率指標(biāo)符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，保證使用蠶種質(zhì)量，促進(jìn)蠶繭單產(chǎn)效益提高，促進(jìn)蠶農(nóng)增收和蠶業(yè)穩(wěn)定協(xié)調(diào)發(fā)展。

　　現(xiàn)將我省全面實(shí)施一代雜交種成品卵微粒子病檢疫情況介紹如下，供同行參考。

　　一、實(shí)施蠶種成品卵微粒子病檢疫的歷史沿革

　　四川在上世紀(jì)80年代末至90年代初期，家蠶微粒子病爆發(fā)。每年造成直接經(jīng)濟(jì)損失數(shù)千萬元，間接經(jīng)濟(jì)損失上億元。在當(dāng)時(shí)，母蛾微粒子病檢疫合格的蠶種，但在農(nóng)村大面積使用時(shí)，時(shí)有發(fā)生微粒子病、農(nóng)民減產(chǎn)減收的情況。究其原因，一是蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)檢疫體系不健全，多為蠶種場(chǎng)自檢自銷；二是蠶種微粒子病檢疫僅開展了母蛾檢疫，因母蛾樣本的真實(shí)性、代表性問題，使得母蛾檢疫結(jié)果不能真實(shí)反映該蠶種疫病狀況。

　　經(jīng)過多年努力，我省逐步建立起一套行之有效的蠶種檢驗(yàn)檢疫體系和質(zhì)量監(jiān)管體系，并通過科研、教學(xué)、生產(chǎn)單位的協(xié)同攻關(guān)，從1993年首創(chuàng)了蠶種成品卵微粒子病檢疫技術(shù)，于1994年將其納入全國(guó)首部蠶種地方標(biāo)準(zhǔn)《蠶種質(zhì)量》DB51/192-1994和《蠶種檢驗(yàn)規(guī)程》DB51/193-1994。從1999年秋用蠶種起，對(duì)省內(nèi)生產(chǎn)的一代雜交種的越年種、即時(shí)浸酸種、冷藏浸酸種等，逐場(chǎng)、逐批次全面實(shí)施了成品卵微粒子病檢疫。

　　二、蠶種成品卵微粒子病檢疫的具體實(shí)施方法

　　一代雜交種成品卵微粒子病檢疫，采用省站組織，以冷庫(kù)為依托，統(tǒng)一抽樣，統(tǒng)一編碼，逐批檢疫，劃片實(shí)施，省站統(tǒng)一出據(jù)報(bào)告的方式，全面開展。

　　由于蠶種生產(chǎn)使用的季節(jié)性和時(shí)間限制，蠶種檢驗(yàn)檢疫亦存在季節(jié)性和時(shí)間限制。對(duì)成品卵微粒子病檢疫，若嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的時(shí)間、方法抽樣，則可能出現(xiàn)檢疫結(jié)果滯后、檢疫工作安排困難等情況。因此，在實(shí)際檢疫工作中，在保證樣本真實(shí)性、代表性的原則下，適當(dāng)調(diào)整了成品卵微粒子病檢疫抽樣時(shí)間、方法和數(shù)量。具體做法是：

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　　1、越年蠶種

　　在浴消裝盒入庫(kù)時(shí)抽樣。按照《桑蠶一代雜交種檢驗(yàn)規(guī)程》NY/T327-1997的規(guī)定，在3個(gè)以上的位置，每批隨機(jī)抽取蠶種10盒以上，每盒取樣卵2.00g共20g混和均勻，分為2個(gè)7g，其中1個(gè)7g作為正樣，另1個(gè)7g作為備樣。樣本入庫(kù)5℃條件下冷藏，正樣在2月底3月初活性化后，出庫(kù)催青待檢。

　　2、即時(shí)浸酸種

　　在浸酸后抽樣。在蠶種浸酸干燥時(shí)，每批次在3個(gè)以上的位置抽取樣卵20g混和均勻, 其中1個(gè)7g作為正樣催青，另1個(gè)7g作為備樣入庫(kù)2.5℃冷藏。同時(shí)，浸酸后的蠶種入庫(kù)2.5℃下保護(hù)3－5天出庫(kù)，該批成品卵微粒子病檢疫結(jié)果出來后，蠶種尚在催青室，便于處理。

　　3、冷藏浸酸種

　　在入庫(kù)時(shí)、冷藏過程中、浸酸時(shí)等三個(gè)時(shí)期均可抽樣。

　?。?）入庫(kù)時(shí)抽樣：蠶種入庫(kù)時(shí)，分批逐捆抖動(dòng)收集落卵，混勻后取15-20g/批，按即時(shí)浸酸標(biāo)準(zhǔn)浸酸后，樣卵分為2個(gè)7g，其中1個(gè)7g作為正樣催青，另1個(gè)7g作為備樣。

　?。?）冷藏過程中抽樣：蠶種入庫(kù)冷藏約20－25日，分批逐捆抖動(dòng)收集落卵，混勻后取15-20g/批，按冷藏浸酸標(biāo)準(zhǔn)浸酸后，樣卵分為2個(gè)7g，其中1個(gè)7g作為正樣檢驗(yàn)，另1個(gè)7g作為備樣待檢。

　?。?）浸酸后抽樣：同即時(shí)浸酸種抽樣。

　　抽樣時(shí)，省站（或其委托）的具有資質(zhì)的抽樣人員及蠶種生產(chǎn)單位代表參予抽樣。

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　　1、分樣

　　將已抽取的7g/批的正樣樣品卵稱取7個(gè)1g，再將其中的3個(gè)1g裝入較大樣品袋，袋上標(biāo)明樣品編號(hào)、“一檢”字樣及其應(yīng)檢集團(tuán)數(shù)，其余4個(gè)1g另裝入較大樣品袋，袋上標(biāo)明樣品編號(hào)、“二檢”字樣及其應(yīng)檢集團(tuán)數(shù)，一檢、二檢樣品合并裝入樣品袋，袋上同樣標(biāo)明樣品編號(hào)、一檢及二檢集團(tuán)數(shù)，進(jìn)行催青。

　　2、催青

　　為了縮短樣品處置時(shí)間，及早獲取檢疫結(jié)果，及時(shí)指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)際，對(duì)已活性化的樣品卵，在溫度29－32℃、相對(duì)濕度85－95％條件下進(jìn)行催青，促進(jìn)樣卵盡早孵化。

　　3、制樣

　?。?）時(shí)間：樣品卵總孵化率達(dá)到約90％時(shí)，即可安排磨蟻制樣檢疫。

　?。?）磨蟻：以批為單位，將一檢樣本每克用竹簽平分于乳缽18個(gè)孔中（一檢樣本共分18×3＝54個(gè)），每孔約100頭蟻蠶為一個(gè)集團(tuán)；根據(jù)應(yīng)檢集團(tuán)數(shù)對(duì)應(yīng)乳孔中各放1乳棒，用乳棒將蟻蠶充分磨碎后，每孔滴入4-10滴2%KOH，再次研細(xì)。

　　一檢檢出有微粒子病卵集團(tuán)且未達(dá)到不合格標(biāo)準(zhǔn)的，將該批對(duì)應(yīng)的二檢樣本用竹簽平分于另外乳缽（與一檢樣品乳缽近鄰）72（18×4）個(gè)孔中，磨碎（方法同一檢磨蟻）。

　?。?）點(diǎn)樣：根據(jù)一檢（二檢）樣品袋上應(yīng)檢集團(tuán)數(shù)量，按乳缽序號(hào)點(diǎn)板制一檢（二檢）鏡檢標(biāo)本兩套，即每乳孔點(diǎn)樣至兩塊載玻片各1點(diǎn)，每塊載玻片點(diǎn)3點(diǎn)，鏡檢樣本點(diǎn)樣送初檢員2人對(duì)檢。

　?。ㄈz疫

　　1、鏡檢

　　初檢、復(fù)檢及復(fù)毒等按《桑蠶一代雜交種檢驗(yàn)規(guī)程》NY/T327-1997附錄A的規(guī)定執(zhí)行。

　　2、判定

　?。?）微孢子蟲認(rèn)定原則。成品卵微粒子病檢疫鏡檢觀察確認(rèn)是微粒子孢子的，無論其形態(tài)、大小、光澤、運(yùn)動(dòng)狀態(tài)等是否存在差異，均按家蠶微粒子計(jì)入病卵集團(tuán)，按標(biāo)準(zhǔn)判定。

　?。?）成品卵微粒子病檢疫和母蛾微粒子病檢疫并重原則。對(duì)同一批次的蠶種，按相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)在實(shí)施母蛾檢疫的同時(shí)，實(shí)施成品卵檢疫，其中之一判定為不合格的，該批蠶種為不合格。

　?。ㄋ模┏鼍邫z驗(yàn)報(bào)告

　　成品卵微粒子病檢疫結(jié)束后，整理相關(guān)原始記錄，按計(jì)量認(rèn)證通過認(rèn)定的報(bào)告格式，及時(shí)出具檢驗(yàn)報(bào)告。

　?。ㄎ澹z疫不合格的蠶種的處理

　　對(duì)檢疫不合格的蠶種，由省站及時(shí)通知蠶種冷庫(kù)就地封存，在本季蠶種出庫(kù)結(jié)束時(shí)，由管理部門、省級(jí)質(zhì)量監(jiān)管員、冷庫(kù)及生產(chǎn)單位代表，現(xiàn)場(chǎng)核實(shí)銷毀，銷毀記錄報(bào)省站備案。

　　三、蠶種成品卵微粒子病檢疫實(shí)施效果

　　我省從1999年秋季開始，對(duì)一代雜交種全面實(shí)施成品卵微粒子病檢疫，至今已檢疫蠶種2230萬張，成效顯著。

　?。ㄒ唬臋z疫結(jié)果看，每年均檢疫出不合格批次蠶種。

　?。ǘ臋z疫效果看，全省使用蠶種質(zhì)量得到了保證。

　　從1999年秋季起至今，全省無一起因蠶種疫病造成農(nóng)民損失的質(zhì)量事故發(fā)生。

　　（三）農(nóng)民增產(chǎn)增收。

　　全省平均蠶繭單產(chǎn)從1999年的24.5kg/張，增加到2005年的30.4kg/張，2006年春夏季平均單產(chǎn)34kg/張。平均增產(chǎn)6-10kg/張，按今年鮮繭收購(gòu)價(jià)格20元/kg計(jì)，張種增收120-200元。農(nóng)村大面積微粒子病發(fā)生得到了有效控制。



　　四、分析與討論

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　　1、樣本真實(shí)性問題

　　成品卵微粒子病檢疫，由于是對(duì)蠶卵直接抽樣檢疫，在抽樣過程中的抽樣者獨(dú)立于蠶種生產(chǎn)者，能夠較為客觀、公證地按照標(biāo)準(zhǔn)抽樣和對(duì)樣本處置，避免了母蛾檢疫由生產(chǎn)者自己抽樣和處置樣本，可能出現(xiàn)的樣本弄虛作假、或在烘蛾等樣本處置過程中的非標(biāo)準(zhǔn)操作等情況，從而保證了樣本的真實(shí)。

　　2、樣本代表性問題

　　根據(jù)《桑蠶一代雜交種檢驗(yàn)規(guī)程》NY/T327-1997附錄A表B1，成品卵微粒子病檢疫樣本抽樣率見下表。



　　由上表可知：成品卵微粒子病檢疫樣本量占該批蠶卵總量的百分比較低。

　　在批蠶種數(shù)量51－2000張（盒）范圍內(nèi)，樣卵粒數(shù)占該批蠶卵粒數(shù)的百分比在0.988-0.025％之間，抽檢蠶卵集團(tuán)數(shù)占該批蠶卵集團(tuán)總的百分比在0.439-0.020％之間；批蠶種數(shù)量在2000張以上，樣本量占該批蠶卵總量的百分比更低。樣本量占該批蠶卵總量的百分比隨著批蠶種數(shù)量的增加而減少。成品卵微粒子病檢疫樣本量占該批蠶卵總量的比例，低于母蛾微粒子病檢疫樣本母蛾量占該批母蛾總量的百分比（最低為3.1％）。

　　同時(shí)，根據(jù)蠶種浸酸、浴消整理裝盒作業(yè)流程，相鄰浸酸架或浴消筐的蠶種混和在一起，每批次蠶種不可能全部集中混和后再裝盒。因此，批量越大，樣本的代表性越差。

　　3、抽樣時(shí)間問題

　　按照《桑蠶一代雜交種檢驗(yàn)規(guī)程》NY/T327-1997規(guī)定的抽樣時(shí)間，可能出現(xiàn)檢疫結(jié)果滯后的情況。

　　例如：秋用冷藏浸酸蠶種，按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定浸酸后抽樣催青檢疫，若此時(shí)該批蠶種同時(shí)出庫(kù)催青，則蠶種檢疫結(jié)果出來后，蠶種已經(jīng)發(fā)放至蠶農(nóng)，出現(xiàn)檢疫不合格蠶種，處理相當(dāng)麻煩。又如：越年蠶種，按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定中感時(shí)抽樣，由于春用種、夏用種中感時(shí)間不一致，在工作安排上，可一次抽樣檢疫完成的工作，則必須分兩次完成，造成人員、時(shí)間、場(chǎng)地、物資等安排困難。因此，抽樣時(shí)間應(yīng)適當(dāng)調(diào)整。

　　4、成品卵微粒子病檢疫批蠶種數(shù)量問題

　　《桑蠶一代雜交種檢驗(yàn)規(guī)程》NY/T327-1997附錄A表B1規(guī)定的成品卵微粒子病檢疫批蠶種數(shù)量可在2000張以上，且無上限。

　　但是，由于目前桑蠶一代雜交種生產(chǎn)多為原蠶區(qū)收繭制種，農(nóng)戶的飼育技術(shù)、養(yǎng)蠶條件等存在一定的差異，原蠶種繭、蠶卵的同質(zhì)性亦存在較大差異。因此，制種批量越大，蠶種的同質(zhì)性越差，成品卵檢疫樣本的代表性就越低。為了保證成品卵微粒子病檢疫質(zhì)量，應(yīng)適度控制批蠶種數(shù)量。

　　5、成品卵微粒子病檢疫微孢子蟲的認(rèn)定問題

　　據(jù)資料記載，除Nosema bombycis 外，有多種微孢子蟲寄生家蠶后能經(jīng)卵傳遞，即胚胎傳染。經(jīng)胚胎傳染后的不同類別微孢子蟲其感染致病力是否存在差異，在目前蠶種微粒子病檢疫技術(shù)仍以顯微鏡檢、經(jīng)驗(yàn)判斷為主的情況下，不能夠區(qū)分判定。

　　因此，為保證蠶種疫病參數(shù)指標(biāo)符合標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，保證使用蠶種質(zhì)量，成品卵微粒子病檢疫鏡檢觀察確認(rèn)是微粒子孢子的，無論其形態(tài)、大小、光澤、運(yùn)動(dòng)狀態(tài)等是否存在差異，均應(yīng)按家蠶微粒子計(jì)入病卵集團(tuán)。

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　　1、成品卵微粒子病檢疫與母蛾微粒子病檢疫的關(guān)系。

　　母蛾微粒子病檢疫抽樣率相對(duì)較高，但由于是間接檢驗(yàn)，樣本的真實(shí)性可能出現(xiàn)問題；成品卵微粒子病檢疫是直接檢驗(yàn)，樣本真實(shí)性相對(duì)可靠，但蠶卵樣本量占該批蠶卵總量的百分比相對(duì)較低，樣本代表性亦相對(duì)較低。

　　在多年的實(shí)際檢疫操作過程中，確實(shí)存在母蛾檢疫合格、成品檢疫不合格，母蛾檢疫不合格、成品檢疫合格等情況。其中：母蛾檢疫合格、成品檢疫不合格的蠶種，母蛾樣本的真實(shí)性（或樣本處置）可能出現(xiàn)問題；母蛾檢疫不合格、成品檢疫合格的蠶種，則是由于樣本的代表性可能出現(xiàn)問題。此外，傳統(tǒng)的顯微鏡檢、經(jīng)驗(yàn)判定的檢疫技術(shù)亦可能造成的母蛾檢疫與成品檢疫的差異。

　　因此，為了使微粒子病檢疫結(jié)果準(zhǔn)確可靠，保證使用蠶種的微粒子病疫病指標(biāo)符合標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，應(yīng)堅(jiān)持成品卵微粒子病檢疫與母蛾微粒子病檢疫并重。

　　2、蠶種微粒子病檢疫與蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)的關(guān)系

　　蠶微粒子病是有害生物——微粒子原蟲寄生家蠶后感染發(fā)病。蠶種微粒子病檢疫是對(duì)蠶種是否感染微粒子原蟲及感染量（即疫病參數(shù)）是否引發(fā)蠶病造成養(yǎng)蠶損失而進(jìn)行的檢測(cè)、判定。蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)，是對(duì)包括良卵率、孵化率、雜交率、裝盒卵量及包裝質(zhì)量等參數(shù)（非疫病參數(shù)）是否符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的指標(biāo)而進(jìn)行的檢驗(yàn)。蠶種微粒子病檢疫與蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)二者即有聯(lián)系（均為反映蠶種質(zhì)量狀況），又有差異（一個(gè)是反映疫病參數(shù)，另一個(gè)是反映非疫病參數(shù)）。

　　在蠶種生產(chǎn)過程中，母蛾微粒子病檢疫結(jié)束后，檢疫合格蠶種才能并批浸酸或浴消及比選整理裝盒，才能夠進(jìn)行成品卵微粒子病檢疫，蠶發(fā)育到不同階段才能進(jìn)行相關(guān)非疫病參數(shù)的檢驗(yàn)。按照現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)，所有參數(shù)檢測(cè)結(jié)束后才能夠出具檢驗(yàn)報(bào)告，則檢驗(yàn)結(jié)果不能及時(shí)指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)際。

　　因此，在制定蠶種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)規(guī)程時(shí)，應(yīng)充分考慮蠶種的特殊性。建議今后在修訂相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，將蠶種疫病檢疫與非疫病檢驗(yàn)分別制定參數(shù)指標(biāo)、分別檢驗(yàn)（檢疫）、分別出具檢驗(yàn)報(bào)告。

　　五、結(jié)論

　　桑蠶一代雜交種全面實(shí)施成品卵微粒子病檢疫技術(shù)，保證了使用蠶種質(zhì)量，促進(jìn)了蠶繭單產(chǎn)效益提高，效果顯著。成品卵微粒子病檢疫工作應(yīng)當(dāng)堅(jiān)持長(zhǎng)期全面開展。建議對(duì)包括成品卵微粒子病檢疫技術(shù)在內(nèi)的相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)規(guī)程做適當(dāng)修訂，對(duì)微孢子蟲檢測(cè)判定的實(shí)用方法進(jìn)行深入研究，完善檢疫技術(shù)，促進(jìn)蠶業(yè)穩(wěn)定協(xié)調(diào)健康發(fā)展。


信息來源：四川蠶業(yè)管理總站